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SH-SY5Y收貨常見問題及解決方案

更新時間:2022-04-29  |  點擊率:1042

常溫運輸過程中,細胞不免受到震蕩和溫度變化的影響,出現皺縮、聚團甚至脫落的現象。遇到這種情況,不用緊張,只要正確處理,細胞就能恢復正常生長。


收貨時皺縮

常溫細胞收貨后,把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時即可。如果4小時后細胞仍然沒有鋪展開,密度適中的前提下可以靜置過夜(過夜前倒出部分培養基,留5-10mL在瓶中,瓶蓋擰松)。

收貨時聚團

常溫細胞收貨后,先把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時以穩定狀態,再進行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。

收貨時脫落

常溫細胞收貨后,先把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時以穩定狀態再處理。脫落后的細胞通常聚團漂浮,通過離心將漂浮的細胞團收集起來,在離心管里進行胰酶消化后重新鋪板即可。

貼壁細胞常規方法消化下來,和處理好的脫落細胞合并,混勻后鋪板。

SH-SY5Y脫落處理步驟:

1.    1200rpm(約250g)3min離心收集細胞,去除舊培養基;

2.    PBS 重懸細胞,再次 1200rpm(約250g)3min離心,去除PBS;

3.    加入 1mL左右 0.25%胰酶重懸細胞,吹打1-2下吹起沉淀即可;

4.    放入細胞培養箱約 1-3min;

5.    用移液槍輕輕吹打細胞懸液,使細胞團分散;

6.    迅速加入 3-5mL含血清的培養基混勻以終止消化;

7.    1200rpm(約250g)3min離心,去除胰酶;

8.    加入新鮮培養基按合適比例接入無菌培養器皿中;

SH-SY5Y收貨時皺縮、脫落

SH-SY5Y細胞收貨時皺縮、脫落

 SH-SY5Y處理后第三天

SH-SY5Y細胞處理后第三天



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