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RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)都會(huì)遇到哪些問題?

更新時(shí)間:2022-05-25  |  點(diǎn)擊率:985
  RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)就是要對(duì)它的基礎(chǔ)培養(yǎng)條件了如指掌,比如生長(zhǎng)特性、細(xì)胞形態(tài)、所需的培養(yǎng)基,甚至培養(yǎng)環(huán)境、傳代比例等等,做到知己知彼,才能百戰(zhàn)百勝。那么我們?cè)谑褂眠^程中都會(huì)遇到哪些問題呢?
  

RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)基

 

  1、收貨后,細(xì)胞不見了
  
  收到細(xì)胞,期待值滿滿地打開包裝準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng),但在顯微鏡下卻找不到細(xì)胞!這是因?yàn)镽AW264.7細(xì)胞貼壁較松,快遞運(yùn)輸路上受到顛簸,可能會(huì)脫落。脫落的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)基中不容易聚焦。這時(shí)候不用擔(dān)心,把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置兩個(gè)小時(shí)就可以看到了。如果靜置后看到的細(xì)胞仍偏少,請(qǐng)將瓶子里的培養(yǎng)基都轉(zhuǎn)移到離心管里,1200rpm(約250g)離心3分鐘,即可看到沉淀的細(xì)胞。細(xì)胞全部脫落,慌亂之下可能會(huì)一個(gè)細(xì)胞都找不著。這個(gè)時(shí)候離心驗(yàn)證是理想方法。
  
  2、收貨處理后,細(xì)胞不貼壁
  
  將細(xì)胞離心收集,用新鮮的RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞放到新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶里之后,可能會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞成團(tuán)漂浮、不貼壁的情況。這種情況下,把細(xì)胞離心收集,用1mL培養(yǎng)基重懸,慢慢地,輕輕地吹打,直到細(xì)胞被吹成單細(xì)胞,就可以重新鋪板了。RAW264.7脫落后傾向于抱團(tuán),抱團(tuán)時(shí)細(xì)胞是活著的,但很難貼壁。記得一定要把聚成團(tuán)的細(xì)胞吹散成單細(xì)胞,不然細(xì)胞很難重新貼壁。
  
  正確的傳代方法是RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)基的關(guān)鍵,每一步操作都要細(xì)致入微,稍有不慎細(xì)胞就分化了。RAW264.7細(xì)胞不能用胰酶消化,許多實(shí)驗(yàn)室用細(xì)胞刮傳代,這是一種非常經(jīng)典好用的方法。普諾賽在RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)這十幾年里,摸索出一個(gè)更不錯(cuò)的方法:吹打傳代。吹打傳代操作簡(jiǎn)單,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的新手們更友好,也能更好地控制細(xì)胞分化率。
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