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細胞學堂 | 大鼠骨髓間充質干細胞的分離提取

骨髓間充質干細胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）來源于中胚層，是具有多分化潛能的細胞。細胞生物學表明，BMSCs具有較強的增殖能力和多向分化潛能。在不同誘導條件下，可向中胚層細胞如脂肪細胞、成骨細胞、肌細胞等分化。BMSCs是理想的種子細胞來源之一，在細胞替代治療、基因治療及組織器官再造中具有重要的臨床應用價值。本期細胞學堂為大家整理了大鼠骨髓間充質干細胞分離提取的方法、注意事項及鑒定指標，幫助您快速上手開展實驗。分離提取步驟骨髓取...

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細胞學堂 | 細胞培養中的小黑點，原來是它

提起細胞培養，相信很多老師都遇到過培養液中的“小黑點”，因無法確定它的身份而頭痛不已。本期細胞學堂將為大家揭秘這些黑點究竟是什么，幫助您快速上手開展實驗。01血清沉淀血清在融解過程中會產生大量的析出物，呈現出小顆粒樣的東西，甚至呈纖維樣，這是由于血清融解后導致的蛋白、鹽類物質的析出。血清融解時混勻血清靜置融解不混勻，出現黑點顯微鏡下的血清沉淀物影響因素通常血清析出物的多少與融解方法有關。通過4℃冰箱解凍和溶解過程持續搖晃混勻，可以有效避免沉淀產生，而37℃靜置混勻則會有較多沉...

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細胞學堂 | BV2細胞形態問題大揭秘

BV2細胞系由E·Blasi于1990年建立，應用小鼠小神經膠質細胞經逆轉錄病毒介導轉染v-raf/v-myc獲得永生化，在模擬神經系統疾病和研究相關疾病機制方面應用廣泛。BV2細胞保留有小神經膠質細胞多種形態、表征和功能特征，免疫組化結果顯示，BV2細胞為MAC1、MAC2陽性，MAC3、膠質細胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂陰性。培養BV2細胞時，最常遇到的問題就是細胞形態異常，通常伴隨著細胞形狀改變、拉絲較多等，對大家的實驗造成影響。本期細胞學堂為大家整理了BV2細胞的培...

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細胞凋亡的幾種檢測方法

細胞凋亡的幾種檢測方法：一形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙（AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色：如果細胞膜不完整、破裂，臺盼藍染料進入細胞，細胞變藍，即為壞死。如果細胞膜完整，細胞不為臺盼藍染色，則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性，區別壞死細胞有一定的幫...

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疑難解析 | 2023年度直播答疑熱點匯總

細胞培養過程中，我們通常會遇到各種各樣的問題，這些問題一般是多種因素造成的，如細胞密度、培養環境、操作方法等。2023年，普諾賽圍繞細胞培養問題，共舉辦了10場線上直播，吸引了萬余人觀看。直播期間，大家踴躍發言，提出了日常實驗中遇到的問題。本期直播答疑篩選出部分問題做了詳細解答。牙源性干細胞培養時，血清會誘導分化嗎？血清成份復雜，里面包含抑制分化的因子，也包含促進分化的因子；間充質干細胞一類成體干細胞大多可以用血清培養，單能干細胞，用血清不會分化；胚胎干會細胞分化。血清的刺激...

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直播答疑 | 細胞培養答疑專場

12月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題，直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號留言，我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎？消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變，最直觀的表現就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對細胞損傷小還是機械吹打對細胞損傷小？建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有...

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細胞學堂 | A-498細胞知識盤點

A-498（人腎癌細胞）細胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態的細胞系。該細胞系是一種合適的轉染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應用價值，常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養條件與傳代、凍存步驟及常見應用，幫助您快速上手開展實驗。細胞形態A498細胞貼壁生長，呈上皮樣形態，細胞鋪開面積大，單位面積細胞總數量少，少量細胞有觸角；低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣，密度大于100%時邊緣不清晰，細胞與...

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細胞學堂 | 實驗室細胞計數指南

細胞計數是實驗室中常見的一項操作，用于確定樣品中細胞的數量，判斷細胞數量是否滿足實驗需求。本期細胞學堂為大家整理了幾種常見的計數方法：人工手動計數法、自動細胞計數儀法，以及懸浮細胞和貼壁細胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍，幫助您快速上手開展實驗。1人工手動計數法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細胞數量，從而進行統計。操作步驟1將計數板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計數板上；2輕輕吹打細胞懸液，使細胞均勻分布；吸出10μL-20μL左右的細胞懸液滴在蓋片邊緣，使細胞懸液充滿蓋玻...

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